Изониазид

Други, пишу дипломную работу по изониазиду. Подскажите какие способы существуют для изолирования изониазида и его метаболитов из биологического материала. Буду благодарен также если подскажете способы количественного определения в биологическом материале.

Одно из самых "благодатных" (по количеству литературных источников) веществ в судебной химии.
По крайней мере, традиционно извлекается различными вариантами жидкость-жидкостной экстракции. Среди традиционных методов определения - фотометрия и спектрофотометрия; пока - вполне хватает.
Попробуйте собрать все это "в одну кучу":

1. Глонти Ш.И. Судебно-химическое исследование димедрола и тубазида. - В кн.: Труды Тбилисского государственного медицинского института. Т.22.-Тбилиси, 1965.-С.405-408;
2. Гольденберг В.С. Случай отравления тубазидом. - В кг.: Актуальные проблемы гигиенты и эпидемиологии Донбасса. (Тезисы и рефераты докладов 3-й Научной конференции гигиенистов и эпидемиологов Донбасса). Октябрь 1966 г.-Донецк, 1966.-С.16-18;
3. Голденберг В.С. Тубазид в судебно-химическом отношении. - В кн.: Вопросы судебной медицины и криминалистики.-Тернополь, 1968.-С.204-206;
4. Зорин Б.Н., Сухин А.П., Седов А.И., Фартушный А.Ф. Сохраняемость тубазида в трупном материале. - Суд.-мед. эксперт.-1975.-№ 4.-С.34-36;
5. Ильясов Я.З. Судебно-химическое обнаружение тубазида. - Суд.-мед. эксперт.-1966.-№4.-С.43-45;
6. Кокшарова Н.В. К вопросу доказательства изониазида в биологическом материале. - В кн.: Материалы 5-й Всесоюзной научной конференции судебных медиков. Т.II.-Л.:Медицина,1969.-С.71-73;
7. Литман И.И. Обнаружение тубазида в биологическом материале при судебно-химическом исследовании. - В кн.: Актуальные вопросы судебной медицины и криминалистики. Труды ЛенГИДУВа. Вып.49.-Л.,1966.-С.165;
8. Литман И.И. Случай обнаружения тубазида в биологическом материале при судебно-химическом исследовании. - Суд.-мед. эксперт.-1966.-№ 1.-С.27-28;
9. Сухин А.П., Землянко А.Ф., Бейкин С.Г. Влияние сроков пребывания трупов в различных средах на возможность обнаружения тубазида. - В кн.: Первый Всесоюзный съезд судебных медиков (тезисы докладов), 21-24 сентября 1976 г.-Киев, 1976.-С.538-539;
10. Сухин А.П., Коваль Г.С., Фартушный А.Ф. К вопросу о судебно-химическом анализе на тубазид. - Суд.-мед. эксперт.-1972.-№ 1.-С.46-48;
11. Фартушный А.Ф. Обнаружение, изолирование и определение изониазида в трупном материале. - Суд.-мед. эксперт.-1968.-№ 3.-С.26-31;
12. Фартушный А.Ф., Землянко А.Ф., Сухин А.П. Обнаружение производных изоникотиновой кислоты при помощи реакций окрашивания. - В кн.: Первый Всесоюзный съезд судебных медиков (тезисы докладов, 21-24 сентября 1976 г.-Киев, 1976.-С.536-537;
13. Фартушный А.Ф., Матвеенко В.И., Кузьменко Е.Д. Использование микрокристаллоскопии для обнаружения производных изоникотиновой кислоты. - В кн.: Первый Всесоюзный съезд судебных медиков (тезисы докладов, 21-24 сентября 1976 г.-Киев, 1976.-С.538;
14. Фартушный А.Ф., Сухин А.П. Определение производных изоникотиновой кислоты в трупном материале. - Суд.-мед. эксперт.-1973.-№ 4.-С.39-43;
15. Зорин Б.Н., Землянко А.Ф., Фартушный А.Ф., Матвеенко В.И., Бакшинская Р.Е., Бусуек В.В., Сухин А.П., Седов А.И. Распределение тубазида в органах крыс. - Суд.-мед. эксперт.-1981.-№ 1.-С.42-43. Список лит.: С.43;
16. Свiнчук В.С. Визначення iзонiазиду, циклосерину та етiонамiду в сечi. - Фармацевтичний
журнал.-1982.-№ 6.-С.46-49. (На укр. языке). Список лит.: С.48-49 (20 названий);
17. Фартушный А.Ф. К вопросу о диагностике передозировки изониазида. - В кн.: Тезисы докладов V Республиканской расширенной научно-практической конференции судебных медиков и патологоанатомов Эстонской ССР "Актуальные вопросы судебной медицины и патологической анатомии".-Таллин,1981.-С.68-71;
18. Фартушный А.Ф. Хроматоспектрофотометрическое определение производных изоникотиновой кислоты в биологическом материале. - Суд.-мед. эксперт.-1981.-№ 4.-С.42-44;
19. Фартушный А.Ф. К вопросу о диагностике передозироски изониазида. - В кн.: Материалы V Научно-практической конференции судебных медиков и патологоанатомов "Актуальные вопросы судебной медиуины и патологической анатомии".-Таллин,"Валгус",1982.-С.73-76. Список лит.: 3 названия;
20. Щербина О.Н., Крамаренко В.Ф., Крамаренко Г.В., Гудемчук Н.П. Применение гель-хроматографии для определения изониазида и никодина. - В кн.: Материалы симпозиума "Хроматографические методы в фармации".-Тбилиси,1977.-С.85-87;
21. Щербина О.Н., Крамаренко В.Ф. Обнаружение изониазида и никодина в растворах и биологическом материале методом хроматографии в тонком слое силикагеля. - В кн.: Материалы симпозиума "Хроматографические методы в фармации".-Тбилиси,1977.-С.88-92;
22. Лайпанов А.Х., Шульга Т.А., Обухова Т.В. Определение изониазида в фармацевтических препаратах и биологических объектах. - Фармация.-1983.- № 2.- С.33-35. Список лит.: С.35 (6 названий);
23. Свiнчук В.С. Визначення iзонiазиду та рифампiцину при iх сумiснiй наявностi в бiологiчному матерiалi. - Фармацевтичний журнал.-1990.-№ 2.-С.54-56. (На укр. языке). Список лит.: С.55-56 (16 названий);
24. Свинчук В.С., Ревяцкая С.С., Росоха Н.Н. Количественное определение изониазида. - Фармация.-1990.-№ 2.-С.87-90. Список лит.: С.88-90 (119 названий);
25. Фартушный А.Ф., Матвеенко В.И., Бакшинская Р.Е., Матвеенко Н.И. Обнаружение метаболитов тубазида и салюзида во внутренних органах и биологических жидкостях. - Суд.-мед. эксперт.-1990.-№ 4.-С.30-31. Список лит.: С.31 (2 названия);
26. Фартушный А.Ф., Седов А.И., Бусуек В.В. Сохраняемость производных изоникотиновой кислоты в трупном материале. - В кн.: Сб. научных статей "Проблемы теории и практики судебной медицины", Рига,1987.-С.104-106.

Успехов!

Благодарю за такую подборную подборку литературы. Но все же обнаглею в конец. Подскажите, где ее можно найти? На каких интернетресурсах. В библиотеку СМЭ мне пока доступ получить не удалось.

Приветствую! Ничего не могу сказать про интенет-ресурсы для такой достаточно "древней" и узко-специфической литературы; я где-то половину из этого списка читал "по старинке - живьем" - в библиотеке своего отделения и бюро. Могу предположить, что Вы живете в областном центре Украины, где, наверняка, есть свое бюро СМЭ, а в нем - судебно-химическое отделение. В его библиотеке, скорее всего, есть и сборники статей, и журналы Судебно-медицинская экспертиза, Фармацевтичний журнал, Фармация. Сходите в гости, "с протянутой рукой" - сразу оторвать не должны. Попробуйте "протоптать дорожку" в научную медицинскую библиотеку (подобные есть у нас в России в каждом областном центре), и не забывайте библиотеку своего ВУЗа - там точно журналы есть. Кстати, именно донецкие судебные химики (Фартушный "со товариши") много сделали в отношении судебно-химического исследования изониазида - обдумайте и это обстоятельство. Не обязательно ведь все из этого списка разом искать, что-то уже имеет лишь исторический интерес; да и во многих статьях есть свой список литературы - гляньте и это. Кстати, несмотря на такое большое количество работ по изониазиду, в практической судебно-химической "его судьбе" до сих пор немало "белых пятен". Успехов!
ЗЫ: а ведь есть еще одно действующее лицо этой истории - научный руководитель Вашего диплома. Предоставьте ему возможность честно отработать свою добавку к ЗП за это "научное руководство" - пусть подумает об обеспечении Вас хотя бы первоначально необходимой литературой.

Благодарю за действительно ценные советы. Буду обивать пороги.

Всем большой привет от ветеринарных врачей и патологов.
Обращаемся к вам с просьбой о помощи.
Подскажите пожалуйста, используете ли вы для диагностики отравлений изониазидом реакцию с ванадатом аммония?
Это качественная химическая реакция, суть ее в том, что готовят 1%-ный водный раствор ванадата аммония (1г соли 99 мл воды), затем добавляют в этот раствор мочу. Если в моче есть изониазид - раствор должен окраситься в коричневый цвет. Дело в том, что в лаборатории проблема еще на этапе приготовления раствора.. (
Соль эта у нас не растворяется в воде. Хотя вроде как написано (?), что должна быть хорошо растворима в проведении этой реакции.
Может подскажете, что мы не так делаем, спасибо!!!
Или к химикам обращаться?

А Вы не пользовались измерением сывороточной концентрации изониазида?

Я наверное " не в теме" , но извините не понял, как можно пользоваться "измерением сывороточной концентрации"?

Здравствуйте.
Вот , что вам нужно для приготовления раствора аммония ванадата.
1) Нагреть воду до ~90 градусов.
2) Взвесить аммония ванадат (1 гр) и всыпать в горячую воду , при постоянном перемешивании.

Соль растворяется в течении нескольких (1-3) минут. Получаете раствор желтого цвета , так и должно быть.

Да все это удобно делать на плате с магнитной мешалкой.
Успехов.

Рискну предположить, что эта та же самая реакция производных ГИНК с ванадатом аммония, но не с мочой, а с сывороткой крови; все ж таки, концентрация изониазида в сыворотке (цельной крови) несколько более тесно связана с тяжестью отравления, чем та же самая цифирка из мочи. Я обычно всегда так и определяю изониазид: в потрохах - по Фартушному "со товарищи" (1975г.; изолирование солянкой, очистка от белков осаждением трихлоруксусной, нейтрализация и цветная реакция); в крови - по образу и подобию этого же (осаждение белков трихлоруксусной, централизация, колориметрирование).

Здрасте а где вы нашли эту книгу: Глонти Ш.И. Судебно-химическое исследование димедрола и тубазида. - В кн.: Труды Тбилисского государственного медицинского института. Т.22.-Тбилиси, 1965.-С.405-408; Весь инет перерыла - нигде нет.

И вам - доброго времени суток, коллега! Исключительно, "как художник - художнику" - скажу: нигде не находил, т.е. "живьем" - сам не видел. Имел только ссылку, ее и выложил на всеобщее "оборзение"; смысл этой ссылки, как и множества других - показать "долгий хвост", идущий за вопросом об изониазиде. Для человка, серъезно решившего заняться проблемой этого препарата (путь даже и на уровне дипломной работы - это я о топикстартете) - это было бы нужно. Для практиков сегодняшнего дня - думаю, не столь актуально. Что же касается Сети и этой конкретной работы - так на Сети весь мир информации не заканчивается. Но если так интересно - почему бы не попробовать, найдя (в Сети) электронный адрес библиотеки того же Тбилисского мединститута, или их бюро СМЭ, напрямую попросить коллег переслать скан 4 страниц текста? Вдруг профессиональная солидарность окажется сильнее политических противоречий? Удачи!

Добрый день, уважаемые.
Очень нужна ваша помощь.
Есть практическая необходимость поставить качественную реакцию на изониазид (отравили собаку).
Если кто-нибудь может поспособствовать в Москве - будем очень благодарны.
Возможно, смогу провести ее сам по подробной инструкции, но не уверен, что получится добыть реактивы.

Заранее благодарен,
Serg_br

Доброго времени суток, Serg_br. Здесь вариантов несколько: либо обращаетесь в "наши" структуры - Москоское городское бюро СМЭ и Московское областное бюро СМЭ (телефоны найдете) - по личному заявлению за некую плату там сделают и полное исследование на изониазид, с достоверной оценкой результатов, либо только одну эту реакцию (для проведения которой, поверьте, тоже нужен определенный опыт и навыки) - как договоритесь. Либо "уцененный" вариант - если есть моча животного - дойти до клинико-диагностическорй лаборатории противотуберкулезного диспансера (там эта реакция, как абсолютно рутинное исследование, применяется для контроля за приемом препарата больными, особенно в детской практике), до первым попавшевшегося отзывчивого лаборанта. Проводить любое, даже такое простое, исследование "дистанционно", руками не-специалиста, это, конечно, не аппендэктомию по телефону делать, но близко... Либо, если надо срочно, просто проводите противосудорожную терапию собаке (если еще потребно), безо всяких анализов. Пока - так...

Спасибо огромное.
Про необходимый профессионализм - охотно верю.
До туб.диспансеров не догадался - за это отдельное спасибо, но к сожалению, мочИ не добыть. Возможно, они смогут провести качественную реакцию на изониазид в другом материале.
Еще вопрос: в пределах какого времени можно определять изониазид в неживых тканях?

Сочувствую, Serg_br. "Братья наши меньшие" быстро становятся полноправными членами семей...
А сохраняемость изониазида в трупном материала достаточно большая; в свое время, когда только он "входил в оборот" отечественных судебных химиков, было достаточно много работ, в том числе и по изучению этой сохраняемости. Месяцами... тем более, в холодное время года. Но здесь, мне представляется, что нужно учитывать, в первую очередь, время переживания, т.е. промежуток от приема животным вещества до его смерти. За это время, измеряемое уже часами (скажем, не более 1/2-1 суток), вещество изменяется и выводится гораздо существеннее. Да, можно исследовать и другие органы и ткани, не только мочу. Но это, опять же, очень трудно для "заочного инструктирования" (хотя и не составит труда судебному химику). Просто решите для себя: если вы уже уверены в изониазиде, как источнике смерти собаки - что даст Вам - лично - это исследование? А если Вы этим исследованием хотите доказать факт отравления изониазидом кому-то другому (человеку или госструктуре) - то подобного доказательства от Вас-неспециалиста - никто всерьез не воспримет; нужна "солидная бумага" с "солидной синей печатью". Увы...

Доброго дня!
Применялось раньше в туб.диспансерах (лет 20 назад) методика по ГИНС, не для контроля приема, а для подбора правильной дозировки. Говорят, методика была проста, но "рецепт утерян".
Придется обращаться в вет.лабораторию, в которой проводят "ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ПИТОМЦА НЕИЗВЕСТНЫМ ЯДОМ (МЕТОД ГХ-МС, ВЭЖХ-МС)"
При чем, в лаборатории говорят, что у них нет списка распознаваемых ядов, они просто находят яд - всем бы так)))) и отдельно изониазид выявить невозможно.
Делаю вид, что верю))))

Доброго времени суток, Serg_br.
Ну, про утерянные "тайны веков": реакция-то - одна, взаимодействие пр-ных ГИНК с ванадатом аммония - только в одном случае она оценивается визуально, просто по появлению желто-коричневой окраски, качественно, а во втором случае - инструментально фотометрируется и определяется концентрация. Ну, еще некоторые нюансы пробоподготовки позволяют отделить активный, ацетилированный изониазид, от неметаболизированного... Да Бог им судья, "детям" "поколения пепси и нанотехнологий"...
Для "укрепления веры" и "делания вида" - дополнительная инфа. Вот здесь уже поднимался подобный вопрос, и чтобы мне лишний раз не повторять то же самое
http://forum.xumuk.ru/index.php?showtopic=35451
и про вет. лаборатории, ГХ/МС, собак и изониазид у "соседей-славян" (пост #8)
http://forum.sudmed.com.ua/index.php?showtopic=10
Удачи!