Выделение ДНК из подногтевого содержимого



Форум судебных медиков России > Судебная медицина и судебно-медицинская экспертиза > Судебно-медицинская генетика
Lady
Добрый вечер, коллеги! Нужна ваша помощь.
Получила первый раз за практику ногти потерпевшей для генетического исследования. Следствие интересует есть ли биоматериал от подозреваемого в ее подногтевом содержимом. Причем не важно за счет чего он происходит (кровь, клетки...). Думаю сразу приступить к выделению. Как это сделать? Порезать ноготки и в пробирку? Варианты? И чем лучше выделять? Поделитесь опытом, пожалуйста.


Зубр
Цитата(Lady @ 17.08.2012 - 20:25)
Добрый вечер, коллеги! Нужна ваша помощь.
Получила первый раз за практику ногти потерпевшей для генетического исследования. Следствие интересует есть ли биоматериал от подозреваемого в ее подногтевом содержимом. Причем не важно за счет чего он происходит (кровь, клетки...). Думаю сразу приступить к выделению. Как это сделать? Порезать ноготки и в пробирку? Варианты? И чем лучше выделять? Поделитесь опытом, пожалуйста.

Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы.
Удачи.


Пыхтачок
Цитата(Зубр @ 20.08.2012 - 00:51)
Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы.
Удачи.

день добрый, уважаемый Зубр, а если сделать смывы с ногтей, деонизованной водой, и эти фрагменты марли выделить челексом с протеиназой К? у меня , в лучшем случае получился смешанный профиль, а так только "хозяин" ногтей...


Lady
Цитата(Зубр @ 19.08.2012 - 23:51)
Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы.

Спасибо, Зубр! Как всегда приходите на помощь smile.gif
А если ногти большие, ооочень большие, можно ли с них соскоб сделать? Не резать их вряд ли получится.


Sultana
Цитата(Lady @ 20.08.2012 - 16:55)
Спасибо, Зубр! Как всегда приходите на помощь smile.gif
А если ногти большие, ооочень большие, можно ли с них соскоб сделать? Не резать их вряд ли получится.

вполне хорошо получается, если ногти в небольшом количестве воды потрясти на шейкере часа 2, а потом вортекс 5 мин и выделять можно. Если ногти сильно грязные, то лучше Силикой выделять, если более-менее "чистые", то ДНК из подногтевого и челексом с протеиназой хорошо выделяется (если, конечно, там есть что-то кроме потерпевшего)


Русская версия Invision Power Board © 2001-2017 Invision Power Services, Inc.

© 2002-2015 Форум судебных медиков
При копировании материалов сайта размещение активной ссылки на источник обязательно!