И Вам - доброго времени суток, коллега! Да, все реактивы добавляются в одну и ту же кювету с исследуемым раствором; первоначальный отсчет D при 630 нм, затем - капля 10% ацетонциангидрина, перемешать и через 3 минуты - новый отсчет при той же длине волны, затем - несколько кристалликов красной кровяной соли и вновь через 3 минуты - отсчет D при 540 нм. Мы делаем по два параллельных определения каждого объекта - это не трудно, но на душе - поспокойнее. По поводу гематомы: более-менее среднюю пробу сгустка (из разных ее участков) растираем в ступке пестиком (или во флаконе палочкой) с 0,01% водным раствором сапонина, можно добавлять немного предварительно промытого и прокаленного кварцевого песка, и лучше делать это на холоду (подержав все в морозилке), не усердствуя по времени - помятуя о лабильности метгемоглобина. Затем уже слить с остатков сгустка, взмутить в воде, добавить фосфатный буфер и открутить.
Успехов! (хотя и "мутное" это дело - трупья биохимия...
)
ЗЫ: а если хотите почитать про метод чуток подробнее, чем просто краткая таблица - попробуйте поискать в сети следующие старинные книги:
Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина. М.:Медицина, 1968, 326 с.
Биохимические методы исследования в клинике. Справочник /под ред. А.А.Покровского. М.:Медицина, 1969, 652 с.