SOS! ткани после формалина



Форум судебных медиков России > Судебная медицина и судебно-медицинская экспертиза > Судебно-медицинская генетика
genetics
Коллеги, помогите, пожалуйста, советом!

Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось.

Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. https://cyberleninka.ru/article/n/osobennos...ormaline-poster - ссылка на статью. Но прописи приготовления этого буфера нет. Как его приготовить, кто знает, подскажите, пожалуйста!!!

Заранее спасибо!


genetics
Цитата(genetics @ 30.05.2022 - 13:44)
Коллеги, помогите, пожалуйста, советом!

Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось.

Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. https://cyberleninka.ru/article/n/osobennos...ormaline-poster - ссылка на статью. Но прописи приготовления этого буфера нет. Как его приготовить, кто знает, подскажите, пожалуйста!!!

Заранее спасибо!




Вопрос снят. Нашла пропись раствора.
100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА


Зубр
Цитата(genetics @ 6.06.2022 - 15:27)
Вопрос снят. Нашла пропись раствора.
100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА

Доброго времени суток!
Более подробная методика в прикреплённом файле. Нажмите для просмотра прикрепленного файла


genetics
Цитата(Зубр @ 22.07.2022 - 00:28)
Доброго времени суток!
Более подробная методика в прикреплённом файле. Нажмите для просмотра прикрепленного файла


Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая...


Зубр
Цитата(genetics @ 21.09.2022 - 11:09)
Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая...

Методика подготовки/восстановления ДНК из тканей находившихся в формалине - это только первая часть решения задачи. Дальше этап генотипирования, который обычными средствами выполнить затруднительно. Нужны сверхкороткие фрагменты амплификации. То есть, индивидуальные условия для решения специфической задачи. Ну так, немного потеоретизировал. cool.gif


Русская версия Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.

© 2002-2015 Форум судебных медиков
При копировании материалов сайта размещение активной ссылки на источник обязательно!