Получение ДНК из гистологических препаратов



Форум судебных медиков России > Судебная медицина и судебно-медицинская экспертиза > Судебно-медицинская генетика
Зубр
Доброго времени суток!

Бывают случаи, когда биологического материала для ДНК-типирования нет, но сохранились гистологические архивы (стёкла со срезами органов и тканей, парафиновые блоки). Анализировать такой материал весьма непросто, но возможно. ДНК, полученная из тканей, обработанных формалином (стандартная обработка в гистологии), зачастую оказывается непригодной для ПЦР-анализа. Тем не менее, если опыт работы с ДНК достаточно большой, можно попытаться пройти сложности деструкции ДНК и ингибирования ПЦР.
Прикрепляю статью по выделению ДНК из препаратов на стёклах.
По парафиновым блокам добавлю статью позже.
Всех с Новым Годом!

Нажмите для просмотра прикрепленного файла


Зубр
Добавляю статью по получению ДНК из тканей в парафиновых блоках.

Нажмите для просмотра прикрепленного файла


Наталья
Спасибо, Зубр, что отозвались. Я хотела к Вам адресовать автора вопроса. Статьи по получению - это отлично, только тот, кто задал вопрос, делать сам анализ не будет. Очень рада прочитать, что ДНК, полученная из тканей, обработанных формалином (стандартная обработка в гистологии), зачастую оказывается непригодной для ПЦР-анализа, для меня это важно твердо знать. Не далее, как несколько лет назад у нас доктора пытались обвинить в подмене кусочков, по блокам и препаратам генетики писали, что от 2-3 разных трупов. Мы готовились отбиваться именно по таким параметрам и по влиянию смеси объектов в баках и банках, но следователь прекратил дело, не обращая внимания на генетику.


Зубр
Доброго времени суток, коллеги!
Прикрепляю ещё одну статью, а точнее небольшую главу из книги, с классической методикой получения ДНК из тканей в парафиновых блоках. Современные методики обходятся без растворителей, но классику полезно знать.
Всем поклон.

Нажмите для просмотра прикрепленного файла


Зубр
Цитата(Наталья @ 8.01.2008 - 03:30)
Не далее, как несколько лет назад у нас доктора пытались обвинить в подмене кусочков, по блокам и препаратам генетики писали, что от 2-3 разных трупов. Мы готовились отбиваться именно по таким параметрам и по влиянию смеси объектов в баках и банках, но следователь прекратил дело, не обращая внимания на генетику.
Добрый вечер уважаемая Наталья! Что называется: не прошло и полгода, как решил ответить Вам. Честно говоря, не отвечал только потому, что деталей генетической экспертизы не знаю, а абстрактно рассуждать - значит перебирать массу вариантов. Однако, перечитав намедни Ваше сообщение, понял, что у несведущих людей может возникнуть и закрепиться превратное понимание молекулярно-генетических исследований и их результатов.
1. Ткани, почти всегда, в парафиновом блоке много, много для МГЭ. Вот фотография частицы на скальпеле - это более чем достаточно для анализа.
Нажмите для просмотра прикрепленного файла

2. МГЭ проводится либо с несколькими блоками одновременно, либо с несколькими частицами ткани из одного блока (из разных его частей) и требует воспроизводимости результатов.
3. Странно, что упомянутые Вами генетики не смогли определиться с количеством трупов.
4. Самое печальное в вашем посте - поведение следователя.
Всего наилучшего.


Наталья
Цитата
Самое печальное в вашем посте - поведение следователя.
Оно не печальное, почтенный Зубр, а нормальное. Труп вскрывался в маленьком морге. Следователь очень тщательно проверил все объекты, проходящие через морг на протяжении разумного времени (одновременно, до и после), вскрытие проводилось в присутствии врачей, равно, как и забор материала. Далее подозреваемый доктор с этим материалом не контактировал. Также тщательно была проверена судьба объектов, кто и когда с ними имел дело. Данные генетических экспертиз противоречили следственным данным. Посему и доверия у следователя не возникло к последующим генетическим экспертизам, дававшим в разных учреждениях разные результаты, а в одном - вообще от двух разных (но других) трупов. Это не единственный вариант генетических экспертиз, когда потом выяснялось, что все несколько не так и вообще не так. Не хватало еще доктора посадить по таким генетическим данным.


Джек
Уважаемая Наталья! очень интересно, что такое , коренным образом меняющее макроскопическую картину (врачи же на вскрытии присутствовали), может дать подмена гистологического препарата?Понятно. диагноз может быть изменен по гистологии, но чтобы так уж, вплоть до уголовного дела?
Можно в закрытом разделе- если особенности какие-то..


Зубр
Цитата(Наталья @ 18.04.2008 - 21:51)
Оно не печальное, почтенный Зубр, а нормальное... Данные генетических экспертиз противоречили следственным данным. Посему и доверия у следователя не возникло к последующим генетическим экспертизам, дававшим в разных учреждениях разные результаты, а в одном - вообще от двух разных (но других) трупов. Это не единственный вариант генетических экспертиз, когда потом выяснялось, что все несколько не так и вообще не так. Не хватало еще доктора посадить по таким генетическим данным.
Уважаемая 'Наталья'! Конечно у следователя много различных данных, которые он анализирует, и вряд ли должен замыкаться на одной СМЭ. Он был уверен, что труп принадлежит Петрову (назовём его так), а генетика говорит, что - не Петров это. Он назначает другую генетику - опять не Петров. Он снова ищет и находит место с генетикой и получает аж два трупа. Тут он собирает все экспертизы до кучи и выбрасывает их в мусор. Это всё не просто печально, это тоскливо. Я не говорю, что нет генетических подразделений с сомнительной репутацией. Но в данных экспертизах надо было разбираться досконально. Иначе так и будет "развиваться" генетика. Кстати, как следователю удалось всё же доказать, что труп Петрова?
Всего наилучшего.


Русская версия Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.

© 2002-2015 Форум судебных медиков
При копировании материалов сайта размещение активной ссылки на источник обязательно!