Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )
Выделение ДНК из подногтевого содержимого, обмен опытом |
Lady |
17.08.2012 - 19:25
Сообщение
#1 |
Продвинутый участник Группа: СМЭ Регистрация: 17.10.2011 Пользователь №: 29 418 |
Добрый вечер, коллеги! Нужна ваша помощь.
Получила первый раз за практику ногти потерпевшей для генетического исследования. Следствие интересует есть ли биоматериал от подозреваемого в ее подногтевом содержимом. Причем не важно за счет чего он происходит (кровь, клетки...). Думаю сразу приступить к выделению. Как это сделать? Порезать ноготки и в пробирку? Варианты? И чем лучше выделять? Поделитесь опытом, пожалуйста. |
Зубр |
19.08.2012 - 23:51
Сообщение
#2 |
Магистр форума Группа: Модераторы Регистрация: 9.04.2007 Пользователь №: 4 766 |
Добрый вечер, коллеги! Нужна ваша помощь. Получила первый раз за практику ногти потерпевшей для генетического исследования. Следствие интересует есть ли биоматериал от подозреваемого в ее подногтевом содержимом. Причем не важно за счет чего он происходит (кровь, клетки...). Думаю сразу приступить к выделению. Как это сделать? Порезать ноготки и в пробирку? Варианты? И чем лучше выделять? Поделитесь опытом, пожалуйста. Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы. Удачи. |
Пыхтачок |
20.08.2012 - 02:34
Сообщение
#3 |
Новичок Группа: Участники Регистрация: 22.06.2012 Пользователь №: 33 339 |
Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы. Удачи. день добрый, уважаемый Зубр, а если сделать смывы с ногтей, деонизованной водой, и эти фрагменты марли выделить челексом с протеиназой К? у меня , в лучшем случае получился смешанный профиль, а так только "хозяин" ногтей... |
Lady |
20.08.2012 - 16:55
Сообщение
#4 |
Продвинутый участник Группа: СМЭ Регистрация: 17.10.2011 Пользователь №: 29 418 |
Резать на части не обязательно, ведь Вы не генотип ногтей хотите получить. Загрузите срезы ногтевых пластин в буфер для протеиназы. добавьте протеиназу К и "варите" ночь (не более 24 часов). Дальше, либо фенол/хлороформ, либо другие методы - без разницы. Спасибо, Зубр! Как всегда приходите на помощь А если ногти большие, ооочень большие, можно ли с них соскоб сделать? Не резать их вряд ли получится. |
Sultana |
21.10.2012 - 18:26
Сообщение
#5 |
Новичок Группа: Участники Регистрация: 11.10.2012 Пользователь №: 34 300 |
Спасибо, Зубр! Как всегда приходите на помощь А если ногти большие, ооочень большие, можно ли с них соскоб сделать? Не резать их вряд ли получится. вполне хорошо получается, если ногти в небольшом количестве воды потрясти на шейкере часа 2, а потом вортекс 5 мин и выделять можно. Если ногти сильно грязные, то лучше Силикой выделять, если более-менее "чистые", то ДНК из подногтевого и челексом с протеиназой хорошо выделяется (если, конечно, там есть что-то кроме потерпевшего) |
Сейчас: 3.05.2024 - 03:05 |