[jaklin]

Доброго времени суток.
Помогите найти мед.литературу по отравлению серебром. Если есть в эл.варианте - поделитесь, если не трудно.
Может кто из коллег знает о методе Рамона-Кехеля?

Спасибо

[Медик]

Метод Гольджи в модификации Рамон и Кахала для выявления нервных и глиальных элементов сетчатой оболочки
Свежеэнуклеированный глаз разрезают бритвой по экватору, затем удаляют стекловидное тело и помещают весь задний полюс глаза с сетчатой оболочкой на 1–2 дня в смесь из 20 мл 3% бихромата калия и 5–6 мл 1% раствора осмиевой кислоты.
Осторожно высушивают препарат фильтровальной бумагой и переносят на 24 часа в 0,75% раствор азотнокислого серебра.
Без промывания перекладывают на 24–36 часов в смесь, состоящую из 20 мл 3% бихромата калия и 2–3 мл 1% раствора осмиевой кислоты.
Вновь помещают на 24–48 часов в 0,7% раствор азотнокислого серебра. Затем идет быстрое обезвоживание и заливка в целлоидин.

Сообщение отредактировал Медик - 30.11.2014 - 23:10

[Медик]

Вот есть ещё.
Золото-сулемовый метод импрегнации астроцитарной глии по Рамон-и-Кахалю.
Приготовление золото-сулемового раствора.Берут 0,5г.кристаллической сулемы,растирают в порошок и высыпают в колбу с 50мл.дист.воды.Растворяют при нагревании,не доводя до кипения.Фильтруют и в ещё тёплый раствор приливают 6мл.1% раствора хлорного золота.При отсутствии последнего можно воспользоваться золотохлористоводородной кислотой.
Методика импрегнации.1.Фиксация кусочков толщиной не более 0,5см.в бром-формоле при комнатной температуре - от 2 до 20 дней.Более длительное пребывание объектов в фиксаторе не допускается.
Состав бром-формола:
Формалин нейтральный - 15мл.
Дист.вода - 85 мл.
Аммоний бромистый - 2г.
2.Замороженные среды толщиной 15-25мкм.собирают в свежую порцию фиксирующей жидкости.
3.Быстро (несколько секунд) ополаскивают в дист.воде,лучше в 2 чашках.
4.Помещают для импрегнации в золото-сулемовый раствор,оставляя в нём срезы до тех пор,пока они приобретут пурпурный или красноватый тон,примерно на срок от 3 до 6 часов.Не следует долго задерживать срезы в золото-сулемовом растворе после того,как они приорели достаточно выраженную пурпурную окраску,ибо излишне длительное пребывание срезов в этом растворе сопровождается явным снижением качества препаратов,что прежде всего проявляется в потемнении срезов.Во избежание недоразумений рекомендуется проконтролировать качество импрегнации на одном срезе,для чего последний быстро обрабатывают в гипосульфите и ополаскивают в 50о спирте.Импрегнацию проводят при комнатной температуре.Пользуюься бюксами или др.стеклянными чашечками с крышками.Золото-сулемовый раствор может быть использован повторно,но лучше каждый раз готовить свежий.Количество раствора,приготовленного согласно приведённой выше прописи,достаточно для обработки от 6 до 10 срезов в зависимости от их величины.Указанное количество срезов можно обработать в 2 чашках около 6см.в диаметре,которые ставят в темноту и покрывают чёрной бумагой.
5.Фиксируют срезы в 5% растворе гипосульфита 5-10 минут.Вместо 5% раствора гипосульфита пользуются и специальным раствором Кахала следующего состава:
Гипосульфита - 5г.
Дист.воды - 70мл.
Спирта 96о - 30мл.
Концентрированного раствора бисульфита натрия - 5мл.
Этот фиксатор не имеет никаких преимуществ по сравнению с одним 5% гипосульфитом.
6.Промывают в 50о спирте.
7.Вылавливают срезы на предметные стёкла,тщательно расправляют,обезвоживают,просветляют и заключают в бальзам.Помимо ксилола можно использовать оригановое масло.
Результат импрегнации:атроциты и особенно их отростки окрашиваются в пурпурно-красный цвет.Центральные части атроцитов отличаются более резкой,почти чёрной окраской;фон - светло-красный.
Схематически процедура импрегнации представляется в следующем виде:1)фиксация в бром-формоле;2)приготовление срезов и собирание их в фиксаторе;3)ополаскивание в дист.воде;4)импрегнация в золото-сулемовом растворе 3-6 часов;5)фиксация в гипосульфите 5-10мин.6)промывание в 50о спирте;7)обезвоживание,просветление и заключение в бальзам.

[Медик]

Хорошие результаты,даже на старом (до 6 лет) формалиновом материале,даёт модификация метода Р.Кахаля,предложенная Маlik (1960).
Импрегнация по Маlik.
1.Материал фиксируют в 10% р-ре формалина.
2.Приготавливают замороженные серзы толщиной 10-20мкм.
3.Прополаскивают в дист.воде 5-10мин.
4.Обрабатывают в 1-2% р-ре уксусной кислоты - 1 час.
5.Минуя воду,переносят в золото-сулемовый р-р Кахаля на срок от 3 до 24 часов.Достаточность пребывания срезов в этом растворе периодически контролируется.Внешне они должны приобрести,как в оригинальном способе Кахаля,пурпурную окраску,а микроскопически показывать чёткую импрегнацию астроцитарной глии.Для микроскопического контроля срезы каждый раз споласкивают в дист.воде.
6.5% водный раствор гипосульфита - 5 минут (для фиксации окраски).
7.Тщательно промывают в дист.воде.
8.Обезвоживают в спиртах,просветляют и заключают в бальзам.
Результаты:макроглия - чёрно-бурая,фон - пурпурный,ганглиозные клетки едва различимы.

[Медик]

Следует упомянуть ещё очень простой метод Каiser (1962),позволяющий элективно выявлять только астроцитарную глию.
1.Иссечённый материал фиксируют в 20% р-ре формалина не менее 7-8 дней.
2.Из фиксированной ткани вырезают кусочки толщиной до 0,5см.и,не промывая их в воде,помещают в 2,5% р-р двухромовокислого калия на 2-3 дня при температуре 37о.
3.Быстро прополаскивают в дист.воде,обсушивают фильтровальной бумагой и ополаскивают в небольшой порции 2% р-ра азотнокислого серебра.В случае появления красного осадка,в виде облака мути,споласкивание повторяют,пока перестанет образовываться осадок,после чего кусочки переносят на 2 дня (при комнатной температуре и в темноте ) в свежий 2% р-р азотнокислого серебра.Последний берут из расчёта 50мл.раствора на 1 кусочек.
4.Ополаскивают в дист.воде и режут на замораживающем микротоме.Толщина срезов 15-20мкм.
5.Срезы обезвоживают,просветляют и заключают в бальзам.
Результат:астроцитарная глия - чёрная,фон - бесцветный или слегка желтоватый.Недостатком метода являются осадки,часто появляющиеся в препарате по периферии.
Полученные замороженные срезы нельзя долго оставлять в промывной воде,так как это ведёт к ослаблению импрегнации.Допускается заливка обработанных объектов в целлоидин и парафин,однако в этом случае импрегнация глии будет более слабой по сравнению с замороженными срезами.Предлагаемый метод хорош для ориентировочных исследований.

[jaklin]

Дорогой Медик! Большое спасибо за инфу!!!!!!!