Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )
![]() |
![]() |
![]() |
![]() |
![]() ![]() |
![]() |
"Концентрирование" амплификата, Возможная работа со всем объемом амплификата |
![]() |
prostochock |
![]()
Сообщение
#1 |
Претендент ![]() ![]() ![]() Группа: Участники Регистрация: 2.11.2012 Из: Саратов Пользователь №: 34 543 ![]() |
Здравствуйте!
Вопрос такой. Возможно ли использовать Amicon для "концентрирования" амплификата. Сейчас объясню что имею ввиду. Получили амплификат объемом 25мкл, который содержит кучу "мусора" (неотработанные праймеры, NTP и тд). К тому же на форез берем лишь 1 мкл от всех ампликонов. Таким образом, при работе с объектами трудными профиль либо не выходит, либо частичный. Вопрос поры амикона не слишком ли велики для наших ампликонов? И как я понимаю есть Amicon с различным размером пор (или я заблуждаюсь?) Заранее спасибо. |
![]() |
![]() |
Razum72 |
![]()
Сообщение
#2 |
Участник форума ![]() ![]() ![]() ![]() Группа: СМЭ Регистрация: 9.08.2009 Пользователь №: 16 133 ![]() |
Добрый день, уважаемые форумчане!
Рrostochock, амиконы существуют с различным размером пор. Размер пор определяется способностью пропускать вещества в зависимости от их молекулярной массы (Mr), последняя измеряется в килодальтонах, т.о. колонка Амикон 100кДа пропускает все, что по Mr меньше 100кДа. Вам необходимо рассчитать диапазон Mr ваших ампликонов (http://molbiol.edu.ru/appendix/02_02.html) и подобрать соответствующую колонку. Если Вы имеете ввиду "стандартный" идентификационный анализ ПДАФ-типа, то подойдет Амикон 0,5 100кДа, только, по моему мнению, это Вам никаким образом не поможет, избавление от "мусора" в амплификате не решит проблему "частичного" профиля. Всего доброго. |
![]() |
![]() |
prostochock |
![]()
Сообщение
#3 |
Претендент ![]() ![]() ![]() Группа: Участники Регистрация: 2.11.2012 Из: Саратов Пользователь №: 34 543 ![]() |
Добрый день, уважаемые форумчане! Рrostochock, амиконы существуют с различным размером пор. Размер пор определяется способностью пропускать вещества в зависимости от их молекулярной массы (Mr), последняя измеряется в килодальтонах, т.о. колонка Амикон 100кДа пропускает все, что по Mr меньше 100кДа. Вам необходимо рассчитать диапазон Mr ваших ампликонов (http://molbiol.edu.ru/appendix/02_02.html) и подобрать соответствующую колонку. Если Вы имеете ввиду "стандартный" идентификационный анализ ПДАФ-типа, то подойдет Амикон 0,5 100кДа, только, по моему мнению, это Вам никаким образом не поможет, избавление от "мусора" в амплификате не решит проблему "частичного" профиля. Всего доброго. Большое Вам спасибо. Вроде мои ампликоны не должны провалиться) о результах отпишусь, если интересно) |
![]() |
![]() |
![]() ![]() |
![]() |
Сейчас: 7.05.2025 - 13:59 |