Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )

Форум судебных медиков России
 
>

SOS! ткани после формалина, методика приготовления буфера для уменьшения влияния формальдегида на

>
genetics
сообщение 30.05.2022 - 13:44
Сообщение #1


Читатель

Группа: Участники
Регистрация: 5.04.2014
Пользователь №: 39 269


Коллеги, помогите, пожалуйста, советом!

Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось.

Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. https://cyberleninka.ru/article/n/osobennos...ormaline-poster - ссылка на статью. Но прописи приготовления этого буфера нет. Как его приготовить, кто знает, подскажите, пожалуйста!!!

Заранее спасибо!
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
genetics
сообщение 6.06.2022 - 15:27
Сообщение #2


Читатель

Группа: Участники
Регистрация: 5.04.2014
Пользователь №: 39 269


Цитата(genetics @ 30.05.2022 - 13:44)
Коллеги, помогите, пожалуйста, советом!

Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось.

Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. https://cyberleninka.ru/article/n/osobennos...ormaline-poster - ссылка на статью. Но прописи приготовления этого буфера нет. Как его приготовить, кто знает, подскажите, пожалуйста!!!

Заранее спасибо!




Вопрос снят. Нашла пропись раствора.
100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
Зубр
сообщение 22.07.2022 - 00:28
Сообщение #3


Магистр форума
Group Icon
Группа: Модераторы
Регистрация: 9.04.2007
Пользователь №: 4 766


Цитата(genetics @ 6.06.2022 - 15:27)
Вопрос снят. Нашла пропись раствора.
100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА

Доброго времени суток!
Более подробная методика в прикреплённом файле. Судебная медицина - Прикрепленный файл  ____2.doc ( 719.5 килобайт ) Кол-во скачиваний:  139
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
genetics
сообщение 21.09.2022 - 11:09
Сообщение #4


Читатель

Группа: Участники
Регистрация: 5.04.2014
Пользователь №: 39 269


Цитата(Зубр @ 22.07.2022 - 00:28)
Доброго времени суток!
Более подробная методика в прикреплённом файле. Судебная медицина - Прикрепленный файл  ____2.doc ( 719.5 килобайт ) Кол-во скачиваний:  139


Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая...
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
Зубр
сообщение 25.09.2022 - 13:49
Сообщение #5


Магистр форума
Group Icon
Группа: Модераторы
Регистрация: 9.04.2007
Пользователь №: 4 766


Цитата(genetics @ 21.09.2022 - 11:09)
Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая...

Методика подготовки/восстановления ДНК из тканей находившихся в формалине - это только первая часть решения задачи. Дальше этап генотипирования, который обычными средствами выполнить затруднительно. Нужны сверхкороткие фрагменты амплификации. То есть, индивидуальные условия для решения специфической задачи. Ну так, немного потеоретизировал. cool.gif
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием




- Обратная связь Сейчас: 28.04.2024 - 23:06