Цитата(Наркодиспансер @ 18.03.2015 - 09:48)
Здравствуйте, уважаемые эксперты. Подскажите пожалуйста, в чем преимущество высокоэффективной жидкостной хроматографии перед газовой. Очень много вопросов возникает при определении веществ. К примеру на газовом мы определяем вещество, скажем MMB-Chminaca, на жидкостном это вещество обозначается как AB-Chminaca. Опыта в работе с жидкостным хроматографом как у меня, так и моих коллег очень мало. Возникают БОЛЬШИЕ споры. Аппарат жидкостной Agilent 6460 triple quad Хроматограф 1260. Может не качественная пробоподготовка приводит к таким разногласиям, либо библиотека для газового хроматографа не обновлена????
MMB-Chminaca и AB-Chminaca имеют общие метаболиты. Различить их как методом газовой, так и жидкостной хроматографии возможно лишь в том случае, если вы обнаружите в моче исходное, нативное, не метаболизировавшее вещество.
Когда вы проводите исследование методом ГХМС, то производите дериватизацию. Если вы дериватизируете метилированием, то из этого метаболита вы получаете MMB-Chminaca. Но вы должны понимать, что за этим названием скрывается метилированный общий метаболит.
Спектры метаболитов, как правило, получают свое название по исходным, родительским, веществам, которые в это время актуальны.
Когда в библиотеки вносили спектры метаболитов AB-Chminaca, про MMB-Chminaca еще никто не знал.
ВЭЖХ-МС/МС имеет то преимущество, что нет необходимости дериватизировать аналиты. Условия первичной ионизации значительно мягче, поэтому на входе в первый масс-фильтр вы получаете не фрагментированные молекулярные ионы, которые можете отфильтровать, а затем фрагментировать в ячейке соударений и получить масс спектр. Это позволяет определять целевой аналит с очень хорошим отношением сигнал/шум, т.е. с низким пределом обнаружения. Снижаются и требования к пробоподготовке, вплоть до замены экстракционных процедур разбавление мочи ацетонитрилом.
Но, проведение ненаправленного скрининга в ВЭЖХ-МС/МС - весьма проблематично. В этом отношении лидерство пока, несомненно, за ГХМС. И из этого следует, что самое эффективное - это сочетание скрининга на ГХМС и подтверждения сомнительных результатов на ВЭЖХ-МС/МС.
В отношении AB-Chminaca, которую "выдает" ваш жидкостный хроматограф, нужно разобраться что это: нативная AB-Chminaca или ее метаболит? Надо смотреть спектр.